雞新城疫抗體快速檢測(cè)卡?說明書
原理:新城疫也稱亞洲雞瘟,是由新城疫病毒(NDV)引起的雞和多種禽類急性高度接觸性傳染病,主要特征是呼吸困難、下痢、神經(jīng)紊亂、黏膜和漿膜出血。因致病的毒株不同,可表現(xiàn)為嚴(yán)重程度差異很大的疾病。新城疫抗體檢測(cè)卡采用了快速免疫層析檢測(cè)技術(shù),雞新城疫抗體檢測(cè)卡用于檢測(cè)血清中的抗新城疫病毒抗體。把待檢血清加入到加樣孔后,與膠體金標(biāo)記的抗原一起沿層析膜移動(dòng)。?若樣品中存在抗NDV抗體時(shí),與檢測(cè)線上的抗原結(jié)合而顯示酒紅色。如果樣品中不存在NDV抗體時(shí),則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。
【操作方法】
在檢測(cè)卡的加樣孔內(nèi)加入2滴(100ul)待檢血清或血液樣品。
將檢測(cè)卡平放于桌面上,在室溫下靜置20分鐘內(nèi)判定結(jié)果。超過20分鐘的結(jié)果只能作為參考。
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【使用步驟】 在進(jìn)行測(cè)試前先完整閱讀使用說明書,使用前將試劑板和待檢樣本溶液恢復(fù)至室溫(20℃~30℃)。
1.從原包裝袋中取出試劑板,水平放置于觀察者正面, 如上圖右側(cè)所示(打開后請(qǐng)立即使用);
2.吸取待檢樣品溶液 100 微升于金標(biāo)微孔中,用小滴管 吹打*溶解孔內(nèi)紅色物質(zhì),等待反應(yīng) 5 分鐘;
3.吸取孔內(nèi)所有溶液滴加到加樣孔(見上圖)中,加樣 后開始計(jì)時(shí);
4. 結(jié)果應(yīng)在 5~8 分鐘讀取,其他時(shí)間判讀無效。
【結(jié)果判斷】
反應(yīng)板中央出現(xiàn)十字紅線為陽(yáng)性,只出現(xiàn)一字橫線為陰性;橫線與豎線均不出現(xiàn),或僅豎線出現(xiàn)為試劑失效或操作有誤,應(yīng)當(dāng)重新測(cè)試。
組織檢測(cè)步驟:
1、將樣本魚蝦蟹、畜禽肉、內(nèi)臟等去皮去脂肪,用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,稱取3±0.05g均質(zhì)物至15ml離心管中。
2、依次加入4ml蒸餾水、0.5ml試劑A和0.6ml衍生化試劑,振蕩混勻,在65℃水浴中孵育30min。
3、依次加入1ml試劑B、0.4ml試劑C和1瓶提取劑(4ml),振蕩混勻。
4、在室溫下(20-25℃)4000r/min離心5min,取2ml上層有機(jī)相至5ml離心管中,在50-60℃水浴中用氮?dú)猓ɑ蚬咎峁┑目諝獯蹈蓛x)吹干。
5、取1ml凈化劑溶解干燥物,再加入0.5ml試劑D振蕩混勻,在室溫下(20-25℃)4000r/min離心2min,待檢。
?如使用全血標(biāo)本檢測(cè),標(biāo)本的移動(dòng)速度可能較慢,必要時(shí)可在加樣約1分鐘后,在加樣孔內(nèi)滴加1滴PBS作輔助液,以促進(jìn)標(biāo)本移動(dòng)。
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