NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)檢測試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
試劑盒名稱:NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)檢測試劑盒
規(guī)格:50管/48樣
使用目的:
本試劑盒用于測定樣本中NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)含量。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
測試方法:紫外分光光度法
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠、植物ELISA檢測試劑盒等
實驗原理:
NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
測定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。
使用注意事項:
1.為保證準(zhǔn)確的測試結(jié)果,情嚴(yán)格按照在規(guī)定的時間內(nèi)和適當(dāng)?shù)臏囟认逻M(jìn)行溫育。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存。
2.洗板不正確會導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前先盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5.避免試劑和標(biāo)本的交叉污染。
6.避免強(qiáng)光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。
9.不能使用過期產(chǎn)品。
10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。